Objetivo: identificar a prática de higiene das mãos por profissionais da saúde para promoção da biossegurança. Método: trata-se de uma revisão de literatura, realizada nas bases de dados: LILACS, SciELO e PUBMED. No período de fevereiro a março de 2023, utilizando artigos em português, inglês e espanhol. Privilegiou-se artigos originais na íntegra, descritores (DeCS) em português: higiene das mãos e biossegurança; entrecruzados pelo marcador booleano "AND". Ao final de todas as etapas e leitura dos artigos restaram 7 artigos para compor a amostra final. Resultados: fica evidente uma contradição entre quem teoricamente compreende a importância da prática de higiene das mãos como medida de biossegurança e o quantitativo de profissionais que realizam a técnica asséptica adequadamente. Observa-se a necessidade de mais pesquisas sobre a temática, pois a prática correta de higiene das mãos é um fator de proteção à saúde do trabalhador e crucial para minimizar as infecções relacionadas à assistência à saúde. Conclusão: a prática de higiene das mãos é uma das principais medidas de proteção à saúde do trabalhador e à segurança do paciente, contribuindo para a diminuição das infecções relacionadas à assistência à saúde.